Galangin AML-12 Hücrelerinde Daktinomisine Bağlı Gelişen Hepatotoksisiteyi HafifletirMelek Akıncı1, Cagatay Oltulu2, Elvan Bakar3, Zatiye Ayça Çevikelli Yakut41Trakya Üniversitesi Eczacılık Fakültesi, Farmakoloji Ana Bilim Dalı, Edirne
2Trakya Üniversitesi Eczacılık Fakültesi, Farmasötik Toksikoloji Ana Bilim Dalı, Edirne
3Trakya Üniversitesi Eczacılık Fakültesi, Temel Bilimler Ana Bilim Dalı, Edirne
4Trakya Üniversitesi Eczacılık Fakültesi, Farmakognozi Ana Bilim Dalı, Edirne
GİRİŞ ve AMAÇ: Bu çalışmanın amacı galanginin (Gal) daktinomisin kaynaklı hepatotoksisite üzerindeki etkilerini in vitro olarak incelemektir.
YÖNTEM ve GEREÇLER: AML-12 hücre hattı, kontrol, Gal, daktinomisin ve Gal+daktinomisin olmak üzere 4 gruba ayrılmıştır. IC50 dozu tiazolil mavi tetrazolyum bromid (MTT) yöntemi ile belirlenmiştir. Glutatyon (GSH), süperoksid dismutaz (SOD), katalaz, kaspaz 3 (CAs-3), Cas-9, apoptotik proteaz aktive edici faktör 1 (Apaf-1), Bcl-2, Bax, p53, apoptoz bağlayıcı protein inhibitörü (smac/DIABLO), topoizomeraz (Top) I, Top II gen ekspresyonları qRT-PCR analizi ile incelenmiştir.
BULGULAR: Daktinomisin, oksidatif etkilere yanıt olarak SOD, katalaz ve glutatyon ekspresyonunu arttırmıştır. Gal+daktinomisin grubunda Gal uygulaması, antiapoptotik etkilerle Apaf-1 ekspresyonunu azaltırken, Bcl-2 ekspresyonunu arttırmıştır. Daktinomisin grubunda DNA hasarına karşı savunma mekanizması nedeniyle p53 seviyeleri artmıştır. Galangin, hasarlı yapıları kaldırmak amacıyla smac/DIABLO ekspresyonun arttırmıştır. Gruplardaki Bcl-2 ve smac/DIABLO ekspresyon seviyeleri ters orantılıdır. Gal+daktinomisin grubunda Top II ekspresyon düzeyi, daktinomisin grubuna göre daha düşük bulunmuştur. Bu sonuç, çift sarmal DNA hasarının Gal tarafından azaldığını göstermektedir.
TARTIŞMA ve SONUÇ: Gal, antioksidan ve antiinflamatuvar etkileri ile, daktinomisine bağlı hepatotoksisiteyi hafifletmiştir. Gal'in karaciğer hasarında kullanımını belirlemek için daha ileri deneysel çalışmalara ihtiyaç bulunmaktadır.
Anahtar Kelimeler: Daktinomisin, Galangin, AML-12 hücre hattı, Hepatotoksisite, Oksidatif stres, Apoptoz
Galangin Alleviates Dactinomycin Induced Hepatotoxicity in AML-12 CellsMelek Akıncı1, Cagatay Oltulu2, Elvan Bakar3, Zatiye Ayça Çevikelli Yakut41Department of Pharmacology, Trakya University Faculty of Pharmacy, Edirne, Turkey
2Department of Pharmaceutical Toxicology, Trakya University Faculty of Pharmacy, Edirne, Turkey.
3Department of Basic Phamaceutical Sciences, Trakya University Faculty of Pharmacy, Edirne, Turkey.
4Department of Pharmacognosy, Trakya University Faculty of Pharmacy, Edirne, Turkey
INTRODUCTION: The purpose of this study was to evaluate the effects of galangin (Gal) on dactinomycin induced hepatotoxicity in vitro.
METHODS: AML-12 cell line was divided into 4 groups as control, Gal, dactinomycin, and Gal+dactinomycin. IC50 dose was determined by Thiazolyl Blue Tetrazolium Bromide (MTT) test. Gene expressions of glutathione (GSH), superoxide dismutase (SOD), catalase, caspase 3 (cas-3), cas-9, apoptotic protease activating factor-1 (Apaf-1), B cell CLL/lymphoma-2 (Bcl-2), Bcl-2 associated X protein (Bax), tumor protein p53 (p53), second mitochondria-derived activator of caspase/direct inhibitor of apoptosis-binding protein (smac/DIABLO), topoisomerase (Top) I, and Top II were determined with qRT-PCR analysis.
RESULTS: Dactinomycin elevated expression of SOD, catalase and GSH in response to oxidative effects. In the Gal+dactinomycin group, Gal administration reduced Apaf-1 expression and increased Bcl-2 expression with antiapoptotic effects. In dactinomycin group, p53 levels increased due to the defense mechanism against DNA damage. Galangin increases smac/DIABLO expression to remove damaged structures. Bcl-2 and smac/DIABLO expression levels in the groups are inversely proportional. In Gal+dactinomycin group, Top II expression level was lower than dactinomycin group. This result indicated that double strand of DNA damage is diminished by Gal.
DISCUSSION AND CONCLUSION: Gal improved the hepatotoxicity due to dactinomycin with antioxidant and antiapoptotic effects. Further experimental studies are needed to establish the use of Gal in liver damage.
Keywords: Dactinomycin, Galangin, AML-12 cell line, Hepatotoxicity, Oxidative stress, Apoptosis
Sorumlu Yazar: Melek Akıncı, Türkiye
|
|
Yazdır
Alıntıyı İndir
RIS
E-Postala
Paylaş
Yazara e-posta gönder
PubMed