Ruksolitinib İle Engellenen Glioblastoma İnvazyonunda Anjio-Mikrorna’ların Ekspresyon ProfiliEmre Delen1, Oğuzhan Doğanlar21Trakya Üniversitesi Tıp Fakültesi, Beyin Ve Sinir Cerrahisi Ana Bilim Dalı, Edirne
2Trakya Üniversitesi Tıp Fakültesi, Tıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı, Edirne
GİRİŞ ve AMAÇ: MikroRNA’lar (miR), insan genomunda gen ifadesinin düzenlenmesinde önemli rolü olan düzenleyicilerdir. Son yıllarda anjiogenezde rol oynayan spesifik bir miR grubu tanımlanmış (anjio-miR) ve bazı anjio-miR’lerin gliomalarda etkin rol oynadıkları ortaya konmuştur. Bu çalışmada, glioblastoma hücrelerindeki anjio-miR’lerin ifade değerlerindeki değişiklikleri ve bu değişikliklerin invazyon ve tümör büyümesi ile ilişkisini araştırdık.
YÖNTEM ve GEREÇLER: Bu çalışmada, insan glioblastoma hücre hattı U-87 MG kullanılarak glioblastoma tümör sferoidleri elde edildi. Matrijel yöntemi ile tümör sferoidlerine 48 saat süresince 50 nM, 100 nM and 200 nM ruksolitinib uygulandı. 48 saat tedaviden sonra glioblastoma tümör sferoidlerinde tümör hacmi ve invazyon oluşumu relatif yüzde tümör gelişimi ve relatif yüzde invazyon alanı ölçüldü. Aynı zamanda, niceliksel gerçek zamanlı polimeraz zincir reaksiyonu (qRT-PCR) analizi yapıldı ve miR ifade değerleri belirlendi. Farklı şekillerde ifade edilen miR'ların modelini görüntülemek için normalize edilen miR ifade değerleri kullanılarak Heatmap ve Volcano plot analizleri ile seçilen en önemli miR’ler gösterildi.
BULGULAR: Tümör sferoidlerine 50 nM, 100 nM ve 200 nM ruksolitinib uygulamasının tümör hacmi ve invazyon üzerine etkisi değerlendirildiğinde, uygulanan her dozda anlamlı fark saptandı. 200 nM ruksolitinib dozunda tümör yayılımını engelleyici etkisinin en yüksek olduğu gözlendi. 200 nM ruksolitinib uygulaması ile qRT-PCR testi ile elde edilen miR ifade değerleri incelendiğinde 10 miR’nın (miR_15b, miR_18a_5p, miR_19a_3p, miR_21_3p, miR_27a_5p, miR_31_3p, miR_130a_5p, miR_132_3p, miR_155_3p, miR_200b_5p) ifade değerlerinin arttığı, 4 tanesinin (miR_21_5p, miR_210_3p, miR_221_3p, miR_424_5p) ise ifade değerlerinin azaldığı belirlendi (p<0,05).
TARTIŞMA ve SONUÇ: Sonuçlarımız, Ruksolitinib'in, muhtemelen anjiyo-miRNA'ların düzenlenmesi yoluyla anjiyogenez sinyalini baskılayarak, tümör hacmini ve insan GBM tümör sferoidlerinin istilasını engellediğini göstermektedir.
Anahtar Kelimeler: miR, glioblastoma, anjiogenez, invazyon
The Expression Profiles Of Angiomirs in Glioblastomas Invasion Inhibited By RuxolitinibEmre Delen1, Oğuzhan Doğanlar21Department Of Neurosurgery, Trakya University, Edirne, Turkey
2Department Of Medical Biology, Trakya University, Edirne, Turkey
INTRODUCTION: microRNAs(miR) have an essential role on the regulated gene expression in the human genome. In recent years, a specific miR group was called to angio-miRs due to their role in the angiogenesis, and recent study showed that they involved in the pathogenesis of gliomas. In this study, we investigated the changes in the expression profiles of angio-miRs in glioblastoma cells and identified relationship between these genes and invasion and tumor growth.
METHODS: Glioblastoma tumor spheroids were obtained using the human glioblastoma cell line U-87 MG. 50 nM, 100 nM and 200 nM ruxolitinib were applied to tumor spheroids for 48 hours by using Matrigel method. Tumor volume and invasion formation relative % tumor growth and % invasion area were measured in glioblastoma tumor spheroids after 48 hours of treatment. Quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR) analysis was performed and miR expression profiles were determined. The most important miRNAs selected along with the Heatmap and Volcano plot analyzes were used to display the pattern of the differentially expressed miRs using normalized miR expression profiles.
RESULTS: When the effect of 50 nM, 100 nM and 200 nM ruxolitinib administration to tumor spheroids on tumor volume and invasion was evaluated, a significant difference was found at each dose applied. However, at the dose of 200 nM ruxolitinib, it was observed that the inhibitory effect of tumor invasion was the highest. When miR expression profiles obtained by qRT-PCR test with 200 nM ruxolitinib adminisration were evaluated, it was determined that the expression profiles of 10 miRs (miR_15b, miR_18a_5p, miR_19a_3p, miR_21_3p, miR_27a_5p, miR_31_3p, miR_130a_5p, miR_132_3p, miR_155_3p, miR_200b_5p) increased and the expression profiles of 4 miRs (miR_21_5p, miR_210_3p, miR_221_3p, miR_424_5p) decreased (p<0,05).
DISCUSSION AND CONCLUSION: Our results suggest that Ruxolitinib inhibits tumor volume and invasion of human GBM tumour spheroids, possibly by suppressing angiogenesis signalling via regulation of angio-miRNAs.
Keywords: miR, glioblastoma, angiogenesis, invasion
Emre Delen, Oğuzhan Doğanlar. The Expression Profiles Of Angiomirs in Glioblastomas Invasion Inhibited By Ruxolitinib. IUYD. 2022; 10(1): 0-0
Sorumlu Yazar: Emre Delen, Türkiye |
|
Yazdır
Alıntıyı İndir
RIS
E-Postala
Paylaş
Yazara e-posta gönder
PubMed