DNaz I VE Proteinaz K Enzimlerinin Listeria monocytoges Bakterisine Ait Serotiplerin Çoklu Kültürlerinde Biyofilm İnhibisyonuna Etkinliklerinin İncelenmesiHamide Sena Or, Reha Onur AzizogluAkdeniz Üniversitesi Gıda Mühendisliği Bölümü
GİRİŞ ve AMAÇ: Listeria monocytogenes bakterisinin neden olduğu listeriosis sıklıkla görülmemesine rağmen etkilediği popülasyon grubunda ölümcül enfeksiyonlara neden olur. L. monocytogenes bakterisinin biyofilm oluşturma özelliği, bu bakterinin çevresel stres koşullarına ve antimikrobiyel ajanlara karşı direnç göstermesinde önemli rol oynamaktadır. Çalışmanın amacı, biyofilmlerin spesifik enzim grupları ile inhibisyonunun etkinliğinin araştırılmasıdır. YÖNTEM ve GEREÇLER: L. monocytogenes bakterisinin farklı suşları ve biyofilm oluşturma yeteneklerine göre seçilmiş üç suşun ikili kombinasyonları ile oluşturulmuş çoklu kültürlerinin oluşturduğu biyofilm yapılar incelenmiş ve DNaz I ve Proteinaz K enzimlerinin L. monocytogenes bakterisini biyofilm oluşturma kapasitesini engelleme yetenekleri belirlenmiştir. Seçilen suşların ikili kombinasyonlarının biyofilm oluşturma kapasiteleri OD (595 nm) değeri ile belirlenmiş ve suşlar arası olası sinerjist etki araştırılmıştır. Son fazda çoklu kültürlere DNaz I ile Proteinaz K enzimleri, biyofilm inhibisyonundaki etkinliğini test etmek amacı ile uygulanmıştır. BULGULAR: Çalışma sonucunda, NCTC 5345- 4b ve 1/2b-4b kültür karışımları için 50 μg/μl Proteinaz K enziminin en etkili biyofilm inhibisyonunu sağladığı belirlenmiştir. NCTC 5345-1/2b çoklu kültüründe inhibisyon için benzer olarak 50 μg/ml Proteinaz K oldukça etkili iken 48 saatlik inkübasyon sonrasında yapılan testlerde 200 μg/ml konsantrasyonda Proteinaz K enziminin de etkisinin yadsınamaz olduğu gözlemlenmiştir. TARTIŞMA ve SONUÇ: .Yapılan çalışmada, tüm enzim uygulamalarından elde edilen verilerin karşılaştırılmasıyla en etkili inhibisyon sağlayan enzimin 50 μg/ ml konsantrasyonda Proteinaz K olduğu sonucuna varılmıştır. Elde edilen bu neticenin, oluşmuş biyofilmlerde inhibisyona dair süregelen çalışmalara benzer olarak literatüre katkı sağlaması ve kontaminasyon risklerini azaltıcı yeni yöntemler geliştirilmesinde rol oynaması hedeflenmektedir.
Anahtar Kelimeler: Biyofilm İnhibisyonu, Enzim, Listeria monocytogenes
Investigation of the Activities of DNase I and Proteinase K Enzymes on Biofilm Inhibition in Multiple Cultures of Listeria monocytogesHamide Sena Or, Reha Onur AzizogluAkdeniz University, Department of Food Engineering
INTRODUCTION: Although listeriosis caused by Listeria monocytogenes is not frequently encountered, it leads to fatal infections in affected population. The ability of L. monocytogenes to form biofilms plays a significant role in its resistance to environmental stress conditions and antimicrobials. The aim of this study is to investigate the effectiveness of inhibiting biofilm formation with specific groups of enzymes. METHODS: Biofilm structures formed by mixed-cultures created with combinations of three selected strains of L. monocytogenes, based on their abilities to form biofilms, were examined. The abilities of DNase I and Proteinase K enzymes to inhibit the capacity of L. monocytogenes to form biofilms were determined. The biofilm formation capacities of selected strain combinations were determined by OD (595 nm) value, and possible synergistic effects between strains were investigated. In the final phase, DNase I and Proteinase K enzymes were applied to multi-cultures to test their effectiveness in inhibiting biofilms. RESULTS: As a result of the study, it was determined that 50 μg/μl ProteinaseK enzyme provided the most effective inhibition for NCTC 5345-4b and 1/2b-4b culture mixes. Similarly, 50 μg/μl ProteinaseK was very effective for inhibition in NCTC 5345-1/2b mix-culture. DISCUSSION AND CONCLUSION: .In this study, it was concluded that Proteinase K enzyme at a concentration of 50 μg/ml was the most effective inhibitor compared to all enzyme applications. It is aimed that this result, similar to ongoing studies on inhibition in formed biofilms, will contribute to the literature and play a role in the development of new methods to reduce contamination risks.
Keywords: Biofilm inhibition, Enzyme, Listeria monocytogenes
Sorumlu Yazar: Reha Onur Azizoglu, Türkiye
|
|